La lista a continuación señala las primeras ciudades fundadas en el territorio venezolano en el primer siglo de la conquista.
| Nombre | Fecha | Fundador | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Santa Cruz (La Guajira) | 1502 | Alonso de Ojeda | Abandonada al poco tiempo |
| Nueva Toledo (Cumaná) | 1510 | Misioneros | Destruida al poco tiempo por los indios |
| Nueva Cádiz (Cubagua) | 1520 | Abandonada en 1544 | |
| Coro | 1529 | Ambrosio Alfinger | Fundada por los Welser, pero poblada definitivamente por Juan de Tolosa en 1545 |
| Maracaibo | 1529 | Ambrosio Alfinger | Repoblada por Alonso Pacheco en 1571 con el nombre de Ciudad Rodrigo y por Pedro Maldonado en 1574 con el nombre de Nueva Zamora |
| Isla de Margarita | 1530 | ||
| El Tocuyo | 1545 | Juan de Carvajal | |
| Borburata | Juan de Villegas | ||
| Nueva Segovia (Barquisimeto) | 1552 | Juan de Villegas | |
| Nueva Valencia del Rey | 1555 | Alonso Díaz Moreno | |
| Trujillo | 1556 | Diego García de Paredes | |
| Mérida | 1558 | Juan Rodríguez Suárez | |
| San Cristóbal | 1561 | Juan Maldonado | |
| Nueva Córdoba (Cumaná) | 1562 | Francisco de Montesinos | Consolidada por Diego Hernández de Serpa en 1569 |
| Santiago de León de Caracas | 1567 | Diego de Lozada | Fundada originalmente por Francisco Fajardo, como San Francisco, fue destruida por los indíginas. |
| Caraballeda | Diego de Lozada | Tambíen en este sitio fundó Francisco Fajardo un pueblo llamado El Collado, pero fue abandonado. | |
| Carora | 1569 | Juan del Thejo | |
| Espíritu Santo de la Grita | 1576 | Francisco de Cáceres | |
| Altamira de Cáceres (Barinas) | 1577 | Francisco de Cáceres | |
| San Cristóbal de Nueva Ecija de Cumanagotos | 1585 | Cristóbal Cobo | Cerca de Barcelona, abandonada al poco tiempo |
| San Sebastián de los Reyes | Sebastián Días de Alfaro | ||
| Pedraza | 1592 | Francisco de Cáceres | |
| Santo Tomé de Guayana (Angostura, Ciudad Bolívar) | 1595 | Diego Hernández de Serpa | Destruida en 1617 por orden de Walter Raleigh, mudada de sitio varias veces, hasta que en 1762 es fijada en el sitio actual por Joaquín Sabás Moreno de Mendoza |
| Barinas | Pacheco de Mendoza |
Agradecimiento a Juan Carlos Ganteaume, quien amablemente colaboró con algunos datos sobre las ciudades del siglo XVI.